细胞无血清培养基被广泛应用与哪些地方？如何使用？

发布时间：2022-01-12

　　细胞无血清培养基被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备单克隆抗体，病毒抗原和重组蛋白等。大多数的无血清培养基含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素，以及一些蛋白质和清蛋白，纤维蛋白，胎球蛋白等，这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能，如提供细胞贴壁所需的基质，抗生物反应器剪切力，作为脂质和其他生长分化因子的载体等。

　　无血清培养基应用的优点：

　　（1）成分的限定性；

　　（2）产品质量一致性；

　　（3）简化生产过程；

　　（4）易于控制培养环境；

　　（5）细胞类型的优化配方。

　　无血清培养基应用

　　1、DC细胞、CIK细胞和NK细胞的长期增殖培养

　　2、PBL细胞和TIL细胞的长期增殖培养

　　3、单核细胞和巨噬细胞的长期增殖培养

　　4、T淋巴细胞的长期增殖培养

　　细胞无血清培养基使用方法

　　1、采集与分离外周血采集外周血，Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。

　　2、单个核细胞的接种与诱导活化

　　1)0d时，绷胞计数。按细胞密度2x106cell/mL接种至对应体积的培养液中。添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。

　　2)1d时(24小时)，添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。将YC005添加至未经使用的培养基中，待用。

　　3、细胞的连续培养与扩增

　　1)3d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同时添加新加入培养液体积l10%比例的自体血浆。补液比例大致在1：2左右（原有培养液体积：新加培养液体积）

　　2)5d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1：3左右。

　　3)7d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(06-08）x106cell/mL。补液比例大致在1：2左右。

　　4)9d时，将剩余培养液全部加入。

　　4、收获细胞

　　培养周期结束后，依据细胞量收获细胞。

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