核酸提取磁性微球提取纯化的方法

更新时间：2022-09-01

　　核酸提取磁性微球通过对磁珠进行一定的包被（如硅基、氨基、羧基等），从而可以实现对核酸的高通量、自动化提取。磁珠是一类特殊的纳微米材料，它们的尺寸通常在零点几微米到几微米之间，仅为一根头发丝直径的十几分之一到几十分之一，肉眼是无法观测到单个磁珠的。它们具有超顺磁性，在磁场中可以向一侧迅速移动，聚集在一起，而去除磁场后又能够迅速恢复到分散状态。

　　核酸提取磁性微球提取纯化的方法：

　　1、酚/氯仿抽提法

　　通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后，在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分，在有机相中主要是脂类物质，蛋白质位于两相之间。

　　2、醇沉淀法

　　乙醇能够消除核酸的水化层，使带负电荷的磷酸基团暴露出来，NA﹢等带正电荷离子能与磷酸基团结合，形成沉淀。

　　3、层析柱法

　　通过特殊硅基质吸附材料，能够特定吸附DNA，而RNA和蛋白质顺利通过，然后利用高盐低PH结合核酸，低盐高PH值洗脱，来分离纯化核酸。

　　4、热裂解碱法

　　碱法提取主要是利用共价闭合环状质粒与线性染色质在拓扑学上的差异来分离他们，在碱性下，变性蛋白是可溶的。

　　5、煮沸裂解法

　　加热处理DNA溶液，利用线性DNA分子的特性，通过离心将DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片形成的沉淀分离。

　　6、纳米磁珠法

　　运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外加磁场的作用下，从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA。

　　7、其他方法

　　除了上述常用的方法之外，还有超声法、反复冻融法、酶解法及低渗裂解等等多种方法。