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细菌内毒素检查用水的检查法有以下三种
更新时间:2022-03-02
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细菌内毒素检查用水
中的细菌内毒素为革蓝氏阴性菌及某些阴性菌样微生物,如立克次体、螺旋体、衣原体细胞壁外膜中的一种脂多糖成分,它往往在细菌生长时释放或细菌死亡时裂解出来。如果“检查用水”作为样品,则《中国药典》规定其限值为:0.25EU/ml,而不是你说得10EU/ml;如果你作为“细菌内毒素检测时的稀释剂”使用,这是不符合规定的,<中国药典>“细菌内毒素检测法”明确规定稀释剂为“细菌内毒素检查用水”其内毒素含量小于0.015EU/ml(用于凝胶法)。
细菌内毒素检查法是判断供试品中细菌内毒素是否符合规定。细菌内毒素检查包括两种方法,即凝胶法和光度测定法,后者包括浊度法和显色基质法。
1、光度测定法
光度法(包括浊度法和显色法)可定量检测内毒素的含量,能较为准确评估产品在生产过程中污染的相对风险,定量检测的数据不仅有利于追踪产品质量趋势,还能起到风险预警的作用,达到数据完整性的要求。
光度测定法可通过回收率判断出干扰的趋势,尤其对于研究性质的样品(如新产品)更具有优势。
光度法的检测范围比凝胶法宽,使得有干扰的样品可以有更大的稀释倍数,对于部分使用凝胶法无法排除干扰的样品,可以尝试使用光度法建立细菌内毒素检测方法。
2、浊度法
浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,可分为终点浊度法和动态浊度法。
动态浊度法是检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度或透光率所需要的反应时间,或是检测浊度增加速度的方法。
3、显色基质法
显色基质法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少而测定内毒素含量的方法。根据检测原理,分为终点显色法和动态显色法。
动态显色法是检测反应混合物的吸光度或透光率达到某一预先设定的检测值所需要的反应时间,或检测值增加速度的方法。
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